viernes, 7 de septiembre de 2018

Aislamiento de bacterias lácticas para elaboración de ensilaje king grass


Las bacterias lácticas tienen una gran importancia en la elaboración del ensilaje de maíz, las cuales nos pretermitirá reducir el tiempo de fermentación del ensilaje Siendo esto un factor económico de la producción.

El uso del ensilaje es muy común en sistemas de producción animal intensiva de zonas templadas, principalmente por dos razones. Primero, porque durante el invierno no se dispone de un alimento de calidad en los campos y segundo, porque durante todo el año se puede disponer de un suplemento preservado de alta calidad (p. ej.: ensilaje de maíz) para complementar el consumo de pasto y así mejorar la producción de leche y la utilización del nitrógeno (FAO 1999). El ensilaje de forrajes es una técnica de conservación que se basa en procesos químicos y biológicos generados en los tejidos vegetales cuando éstos contienen suficiente cantidad de carbohidratos fermentables y se encuentran en un medio de anaerobiosis adecuada. La conservación se realiza en un medio húmedo, y debido a la formación de ácidos que actúan como agentes conservadores, es posible obtener un alimento suculento y con valor nutritivo muy similar al forraje original (Bertoia 2004). Este método 20 constituye una modalidad muy recomendable, particularmente donde las condiciones climáticas impiden la adecuada confección de heno.  

jueves, 2 de noviembre de 2017



FERMENTACION VEGETAL: ENSILAJE 

El ensilaje es la fermentación de los carbohidratos solubles del forraje por medio de bacterias que producen ácido láctico en condiciones anaeróbicas. la cual permite almacenar alimento en época de cosecha y suministrarlo en época de escasez al animal, conservando su calidad y palatabilidad a bajo costo. esta forma de conservación es una excelente opción ya que en nuestro país existe muchas variedades de forrajes y altos niveles de lluvia la cual me ayudan a producir varias cosechas al año para la alimentación animal en las ganaderías.



El ensilaje se logra por medio de una fermentación láctica espontánea en condiciones anaerobias. Las bacterias epifíticas de ácido láctico (BAC) fermentan los carbohidratos hidrosolubles (CHS) del forraje produciendo ácido láctico y en menor cantidad, ácido acético. Al generarse estos ácidos el pH del material ensilado baja a un nivel que inhibe la presencia de microorganismos que inducen la putrefacción.

METODOLOGIA 
Una vez recolectado el pasto, éste se llevara a la picapasto, la cual me facilitara el manejo del forraje.



una vez picado el forraje se procede al llenado de las canecas (en este caso se llenaron 2 canecas, una adicionándole solo melaza y otra adicionándole melaza y BAL - bacterias acido lácticas). 
El llenado se realiza por capas de forraje no muy gruesas pero tampoco demasiado delgadas y compactándolo lo mas que se pueda. y adicionándole melaza y BAL (a la caneca correspondiente)

        

  



Una vez llenada en su totalidad las canecas, se procede a cerrarlas, no se puede permitir que quede espacio entre la tapa y el forraje, ya que esto me formara una cámara de aire y me podría dañar el ensilaje. 
Antes de cerrar las canecas se saco una muestra de cada caneca, para evaluar el recuento de células al iniciar la fermentación y al finalizar la fermentación. y los resultados fueron:

PC- Mesofilos (aerobios)
MRS - BAC
CROMOCOULT - Colimetria 


CON INICIADO (BAL)
SIN INICIADO
 PC
944
1008
BAL MRS
2596
83
Colif Cromo
2096
1680


Estas canecas se dejan en la finca Santa Ines de la Corporacion Universitaria Lasallista por un tiempo aproximado de 15 - 20 días, una vez transcurrió este tiempo, se abren las canecas buscando un buen resultado del silo, y los resultados encontrados fueron: 

ENSILAJE SIN MICROORGANISMOS:




ENSILAJE CON MICROORGANISMOS:


se puede observar que ambos silos presentan buen color y olor, algo que es muy importante a la hora de evaluar la eficiencia del trabajo. 


En esta imagen podemos observar la diferencia de color que adquiere el silo son y sin microorganismos a comparación del pasto normal:

IZQ(Normal) - CENTRO(Sin Microorganismos) - DER(Con Microorganismos)
Una vez abiertas las canecas, se procede a sacar una muestra representativa de cada una y llevarla al laboratorio para que sean evaluadas, los resultados fueron:


CON INICIADO
SIN INICIADO
PC
10
177
BAL – MRS
+3000
400
COLIF
11
1


 


 CUADRO COMPARATIVO RESULTADOS:


 Iniciando CON
 Final CON
 Iniciando SIN
 Final SIN
 PC
 944
 10
 1008
 177
 BAL
 2596
 +3000
 83
 400
 COLI
 2096
 11
 1680
 1

ANÁLISIS DE RESULTADOS


Con base a estos resultados podemos observar claramente que a la hora del recuento de microorganismos en el medio MRS, hay mayor numero de bacterias Ácido lácticas (BAL) (en este caso fueron +3000), a diferencia que sin microorganismos fueron 400. No solo de estos resultados si no también hablando de organismos mesofilos, es interesante el utilizar las bacterias para disminuir estos microorganismos para que así no causen problemas en el animal. Queriendo decir con esto que puede ser demasiado beneficioso utilizar microorganismos para que actúen en el silo, con esto un silo estará listo en menos tiempo (15 días aprox), lo cual es una excelente opción de utilizar un alimento que sin iniciadores se debe esperar 1 mes para su utilización, a diferencia que con iniciadores solo demorara 15 días, no solo se observaron cambios en aspectos de organismos sino que también en hubieron cambios en el olor de este. Para una persona que piense en vender este tipo de alimentos puede ser una excelente idea aplicar iniciadores, debido a que sera garantizado su tiempo en lo cual sera utilizado y también no tendrá problemas con microorganismos los cuales podrán hacer daño cuando el animal los ingiera. Por ultimo se observo que en la mayoría de los procesos quien tuvo mayor acción fueron las BAL, obteniendo con esta acción muchos beneficios y como ejemplo esta el colif. cromo en donde se observa mayor acción de las BAL, en el inicio del proceso y al finalizar con respecto a PC, actuó en mayor proporción el silo sin iniciadores.


JUAN JOSE POSADA C
SIMON VELASQUEZ
JORGE MORENO 
DANIEL ARROYAVE 







domingo, 13 de noviembre de 2016


PRODUCCIÓN DE ENSILAJE EN MICROBIOLOGIA INDUSTRIAL.


Juan David Cano Gil, Valeria Arango, Juan Jose Zuluaga


El ensilaje es la fermentación anaerobia de carbohidratos solubles presentes en forrajes para producir ácido láctico. El proceso permite almacenar alimento en tiempos de cosecha conservando calidad y palatabilidad, lo cual posibilita aumentar la carga animal por hectárea y sustituir o complementar concentrados. Su calidad es afectada por la composición química de la materia a ensilar, el clima y los microrganismos, el ensilaje es una excelente opción para la alimentación en las ganaderías del país por la gran variedad de forrajes, la intensidad solar y el nivel de lluvias que existen en el trópico. Por las condiciones anteriores se pueden producir varias cosechas en el año, mientras en los países con estaciones solo se cosecha una vez al año.


























Para el desarrollo de la práctica, se activarán en los medios selectivos las bacterias lácticas aisladas en el laboratorio de microorganismos eficientes, para esto se inocularán en agar MRS y M17, 48 horas antes de la práctica, se incubará a condiciones anaerobias y se llevará por patrón de Mc Farland a 1x104 UFC/mL y este culitvo se pondra en la melaza para adicionar solo en el ensilaje con adictivo de BAL.




Llenado y compactación
El llenado del silo, se realizaran en dos canecas plásticas cada uno de 100Kg, una de ellas se realizará sin inoculante y la otra con inoculante. Estos procesos deben efectuarse rápidamente, en capas de 50-60 cm. de altura- En la caneca que se van a emplear inoculantes, cada capa puede ser tratada con una mezcla de melaza-microorganismos, a razón de 5%  de melaza y 1x104 UFC/mL. Inmediatamente se procede a compactar el material en el silo.





















Calidad  del Silo

la evaluación de la calidad del producto ensilado se realizará a los 30 días de realizado el ensilaje mediante análisis microbiológico, comparando los resultados encontrados en el silo con inoculantes y sin inoculantes. 




SE DEJO POR 30 DÍAS EL SILO EN ESTAS CONDICIONES EN EL CENTRO DE PRACTICAS SANTA INES DE LA CORPORACIÓN UNIVERSITARIA LASALLISTA.

En los 30 días el ensilaje pasara por cuatro fases:

Fase 1 - Fase Aeróbica. Esta fase dura pocas horas. El oxigeno atmosfé- rico presente en la masa vegetal disminuye rápidamente debido a la respiración de los microorganismos aerobios y aerobios facultativos como las levaduras y enterobacterias. Además, hay actividad de varias enzimas vegetales, como las proteasas y las carbohidrasas, siempre que el pH se mantenga en el rango normal para el jugo del forraje fresco (pH 6,5-6,0)

Fase 2. Fase de Fermentación Se inicia al producirse un ambiente anaerobio. Puede durar de días a semanas dependiendo de las características del material ensilado y de las condiciones ambientales en el momento del ensilaje. Si la fermentación se desarrolla con éxito, la actividad BAC proliferará y se convertirá en la población predominante. Debido a la producción de ácido láctico y otros ácidos, el pH bajará a valores entre 3,8 a 5,0.

Fase 3. Fase Estable La mayoría de los microorganismos de la fase 2 lentamente reducen su presencia. Algunos microorganismos acidófilos sobreviven este período en estado inactivo; otros, como clostridios y bacilos, sobreviven como esporas. Sólo algunas proteasas y carbohidrasas, y microorganismos especializados, como Lactobacillus buchneri que toleran ambientes ácidos, continúan activos pero a menor ritmo. Si el ambiente se mantiene sin aire ocurren pocos cambios.

Fase 4. Fase de Deterioro Aerobio Ocurre en todos los ensilajes al ser abiertos y expuestos al aire para su empleo, pero puede ocurrir antes por daño de la cobertura del silo (p. ej. roedores o pájaros). El período de deterioro puede dividirse en dos etapas. La primera se debe al inicio de la degradación de los ácidos orgánicos que conservan el ensilaje por acción de levaduras y ocasionalmente por bacterias que producen ácido acético. Esto aumenta el valor del pH, lo que permite el inicio de la segunda etapa de deterioro; en ella se constata un aumento de la temperatura y la actividad de microorganismos que deterioran el ensilaje, los bacilos. La última etapa también incluye la actividad de otros microorganismos aerobios, también facultativos, como mohos y enterobacterias.


Pasado los 30 dias de obtuvieron los siguientes resultados: 

Silo con bacterias lácticas adicionadas.                                           Silo sin bacterias adicionadas









Ambos silos presentaron buen olor algo muy importante en un ensilaje, luego se tomaron en tubos falcon de 50 gramos  de cada silo para hacer todo el análisis microbriologico.








El proceso de análisis microbiologico se hizo en el laboratorio de microbiologia de la corporación universitaria Lasallista.
                                                             

El procedimiento que se hizo fue tomar 10 gramos de cada una de las dos muestras de ensilaje con y sin bacterias que estaba en tubos falcon, se pesaron los 10 gramos  y luego se ponia en bolsas de stomacher junto con 90 ml de agua peptonada esteril, esta dilucion quedaria 10-

Luego se hizo la siembra en el agar M17  con una dilucion 10-
se dejo en incubadora de Co2 por 48 horas, pasadas las 48 horas se obtuvieron los siguientes resultados:













se hizo conteo de colonias en el cuenta colonias, y se obtuvo que en el agar M17 de ensilaje con bacterias lacticas adicionadas se tubo 960 UFC  por placa y en agar M17 sin bacterias en el silo se obtuvieron 285 UFC, con estos resultados se puede observar y concluir que cuando se adiciona bacterias al ensilaje se ayuda a una mejor producin del ensilaje, a estar en menor tiempo y con mejor calidad La fermentación láctica que realizan los microorganismos da un valor agregado a los productos vegetales porque mejora su contenido nutricional, digestibilidad y palatabilidad.

 





martes, 24 de mayo de 2016









BROMATOLOGICO PASTO KING GRASS

Para la realización del bromatológico se hace una determinación de los siguientes elementos:
 Proteína cruda por el método micro kjeldahl, Fibra cruda (weende), Cenizas totales por método gravimétrico, Materia seca (balanza determinadora de humedad) y materia digestible, Energía bruta total y digestible  (Bomba calorimétrica), Espectrofotómetro de luz (determinación de Fósforo), Determinación de Cenizas (mufla)
Objetivo general
·     Determinar el análisis bromatológico del pasto King grass con y sin aditivos, con el fin de determinar diferencias significativas.
Objetivos específicos
·   Aprender a realizar un análisis bromatológico, en el cual pueda determinar la humedad, cenizas, grasa, y la materia seca del King grass
·        Determinar la calidad nutritiva
·         Reconocer lo explicado en clases con los resultados obtenidos en el laboratorio Determinar las ganancias que tuvo el pasto con aditivos 



·    
PROCEDIMIENTO ELABORACION BROMATOLOGICO